过表达慢病毒包装服务

★ 服务描述
cDNA过表达慢病毒包装是根据客户提供的目的基因信息,将其构建至所需的慢病毒过表达载体中,与其余的慢病毒包装辅助质粒共同转染HEK293T细胞包装获得过表达目的基因的慢病毒颗粒。



★ 服务内容
1:根据客户提供的基因信息设计引物;
2:根据客户需求选择合适的慢病毒载体,并扩增目的基因构建慢病毒过表达质粒;
3:将测序正确的慢病毒过表达质粒与其余辅助质粒共同转染HEK293T细胞包装病毒并检测病毒滴度;
4:用包装好的病毒侵染靶细胞,建立稳定转染细胞系;
5:从RNA水平(Real-time PCR)和/或蛋白水平(Western Blot)验证过表达效果;
★ 服务说明
1:客户需提供详细的目的基因信息(完整的cDNA序列或NCBI登录号)及实验要求;
2:目的基因来源可以是客户构建好的慢病毒过表达质粒,也可以提供模板或由我们基因调取来构建;如果调取失败,我们会尽快与您沟通协商购买或全基因合成;
3:我们提供多个慢病毒过表达载体供客户选择(见下方载体信息);
4:对于过表达效果的验证,客户可以选择只从RNA水平(或蛋白水平)进行验证,也可选择两个水平都进行验证;
5:靶细胞和Western Blot 实验需要的一抗由客户提供,也可委托我公司代购;
6:Real-time PCR采用Sybr green 法 三复孔进行过表达效果验证,确保实验结果真实可信;
★ 客户所得
1:构建好的慢病毒过表达质粒(过表达慢病毒颗粒及稳转株细胞);
2:完整的实验报告(包括实验材料,实验步骤,实验结果等)及慢病毒使用操作说明书一份;
★ 服务周期
根据具体服务协商确定;
★ 载体信息


载体编号

携带标记

载体骨架主要元件

荧光

真核抗性

pHY-LV-OE1.1

CMV-MCS

pHY-LV-OE1.2

GFP

CMV-MCS-IRES-GFP

pHY-LV-OE1.3

RFP

CMV-MCS-IRES-RFP

pHY-LV-OE1.4

GFP

CMV-MCS-GFP

pHY-LV-OE1.5

RFP

CMV-MCS-RFP

pHY-LV-OE1.6

puromycin

CMV-MCS-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE2.1

GFP

EF1α-MCS-IRES-GFP

pHY-LV-OE2.2

puromycin

EF1α-MCS-IRES- Puromycin

pHY-LV-OE5.1

GFP

puromycin

CMV-MCS-GFP -PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.2

RFP

puromycin

CMV-MCS-RFP-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.3

RFP

puromycin

CMV-MCS-IRES-GFP-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.4

GFP

puromycin

CMV-MCS-2A-GFP-PGK- Puromycin


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